商品介紹
為什麼選擇 Exo-i
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安全分離 無損分離外泌體 |
快速分離 15分鐘內分離外泌體 |
高純度分離 有效去除水溶性脂蛋白 |
技術原理
多層尺寸排阻層析法 (Dual size-exclusion chromatography)
Exo-i 透過由兩種不同類型之多孔微珠（Porous beads）依序堆疊而成，這種結構不僅僅是透過尺寸將生物顆粒以大小分散開來，還能夠有效去除干擾分析的脂蛋白和可溶性蛋白。
（Scientific reports 11.1 (2021): 1-9.）
使用 Exo-i 分離外泌體
① 於管柱中加入 DPBS 緩衝液進行流洗，完成使用前的預備工作。
② 加入 500 μL 的樣本（如細胞培養後上清液、血漿、血清等）。
③ 若流動停止（無液滴滴下），則需再補充 DPBS。
④ 以每份 500 μL (約0.5 g) 的體積分次收集流出液。
純化測試結果
外泌體相關蛋白表現量的確認
Western blot 結果顯示了a) 肺癌細胞培養基和b) 人類血漿中的EV相關標誌蛋白。 a) 結果表明，與傳統常用的2B管柱相比，Exo-i 更能有效去除非外泌體相關蛋白，並保留外泌體相關蛋白的含量；b) 結果顯示使用 Exo-i 能有效去除非外泌體相關蛋白，並保留外泌體相關蛋白的含量；b) 使用 Exo-i 管柱分離的外泌體組分中外泌體相關蛋白（CD9、CD63、CD81、Alix、Annexin V、Airxin V、TSG、Flotin1）的表達。這些蛋白的鑑定依據MISEV2018指引。
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從血漿中去除脂蛋白和可溶性蛋白 使用 Exo-i 管柱分離血漿外泌體後進行 ELISA 的結果。載脂蛋白和可溶性蛋白（白蛋白）的去除率分別為 91.37% 和 90.96%。透過高效去除其他物質，可以得到較高純度的外泌體。 |
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尺寸、產量、純度 左側結果顯示了透過奈米顆粒分析 (Nanosight) 由血漿中分離之外泌體的粒徑分布與產量，以及小分子蛋白的分布情形。粒徑分布顯示，隨著分餾進行，洗脫液中分子尺寸呈逐漸變小的趨勢；第 11 與第 12 分餾的眾數粒徑落在 100～150 nm 範圍內。下方圖表顯示 囊泡狀顆粒（黑色）與 小分子蛋白（紅色）的濃度分布。此結果顯示，使用 Exo-i 可在最大程度上避免游離蛋白的干擾。第 11 與第 12 分餾 (通常是尺寸 100–150 nm 的外泌體富集區) 中的粒子濃度約為 5.0 × 10⁸ particles/mL。 |
相關文獻
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Early-stage lung cancer diagnosis by deep learning-based spectroscopic analysis of circulating exosomes.
ACS nano 14.5 (2020): 5435-5444.
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A Proteomic Approach to Understand the Clinical Significance of Acute Myeloid Leukemia–Derived Extracellular Vesicles Reflecting Essential Characteristics of Leukemia.
Molecular & Cellular Proteomics 20 (2021).
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Dual size-exclusion chromatography for efficient isolation of extracellular vesicles from bone marrow derived human plasma.
Scientific reports 11.1 (2021): 1-9.
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GCC2 as a New Early Diagnostic Biomarker for Non-Small Cell Lung Cancer.
Cancers 13.21 (2021): 5482.
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