商品介紹
為什麼選擇 Exo-i
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安全分離 無損分離外泌體 |
快速分離 15分鐘內分離外泌體 |
高純度分離 有效去除水溶性脂蛋白 |
技術原理
多層尺寸排阻層析法
Exo-i 可透過填充在色譜柱內的兩層多孔微珠分離外泌體。每顆微珠的孔徑不同，除了透過複雜的尺寸排除法獲得外泌體組分外，還能有效去除乾擾血漿分析的脂蛋白和水溶性蛋白。
（相關論文：Scientific reports 11.1 (2021): 1-9.）
① 於管柱中加入 PBS 緩衝液進行流洗，完成分離前的預備工作。
② 加入 500μL 的生物樣本（如細胞培養液、血漿、血清等）。
③ 若流速停止（無液滴滴下），則額外補充 PBS。
④ 以每份 500μL的體積分次收集流出液。
測試結果
外泌體相關蛋白表現量的確認
Western blot結果顯示了a) 肺癌細胞培養基和b) 人類血漿中的EV相關標誌蛋白。 a) 結果表明，與常用的2B柱相比，我們的色譜柱能有效去除非外泌體相關蛋白，並保留外泌體相關蛋白的含量；b) 結果顯示了使用我們的色譜柱能有效去除非外泌體相關蛋白，並保留外泌體相關蛋白的含量；b) 結果顯示了使用我們的色譜柱分離的外泌體組分中外泌體相關蛋白（CD9、CD63、CD81、Alix、Annexin V、Airxin V、TSG、Flotin1）的表達。這些蛋白的鑑定依據MISEV2018指引。
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從血漿中去除脂蛋白和水溶性蛋白 使用 Exo-i 管柱分離血漿外泌體後進行酵素連結免疫吸附試驗 (ELISA) 的結果。脂蛋白（載脂蛋白）和水溶性蛋白（白蛋白）的去除率分別為 91.37% 和 90.96%。透過高效去除除外泌體以外的其他物質，可以維持較高的純度。 |
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尺寸、產量、純度 左側結果顯示了透過奈米顆粒追蹤分析 (Nanosight) 和小蛋白濃度分佈分析所得的血漿組分中外泌體的尺寸分佈和產量。上圖顯示，囊泡尺寸隨組分的不同而逐漸減少。第11和12組分中囊泡數量最多，且尺寸均在已知的100-150 nm外泌體尺寸範圍內。下圖顯示了囊泡狀顆粒 (黑色) 和小蛋白 (紅色) 的濃度分佈。這些結果表明，使用我們開發的色譜柱製備的外泌體組分可以最大限度地減少無細胞蛋白的污染。 |
文件及相關資料
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“基於深度學習的循環外泌體光譜分析在肺癌早期診斷中的應用。”
ACS nano 14.5 (2020): 5435-5444。  |
“透過蛋白質體學方法了解反映白血病基本特徵的急性髓性白血病衍生細胞外囊泡的臨床意義。”
分子與細胞蛋白質體學 20 (2021)  |
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“雙重尺寸排阻層析法可高效分離骨髓來源的人類血漿中的細胞外囊泡。”
科學報告 11.1 (2021): 1-9。  |
“GCC2 作為非小細胞肺癌的新型早期診斷生物標記。”
Cancers 13.21 (2021): 5482。  |
