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西方墨點法&蛋白質分析
BDCWB15 BIO-DOC 7X Rapid gel stain ; 7倍蛋白凝膠快速染色劑
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BDCWB15 BIO-DOC 7X Rapid gel stain ; 7倍蛋白凝膠快速染色劑
BDCWB15 BIO-DOC 7X Rapid gel stain ; 7倍蛋白凝膠快速染色劑
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BIO-DOC 7X Rapid gel stain
在SDS-PAGE電泳中:
電泳結束後,用蒸餾水清洗SDS-PAGE兩次,每次5分鐘。
用超純水
將
BIO-DOC 7X Rapid gel stain
稀
釋至
1X
。
將凝膠放入稀釋的
1X
Rapid gel stain
中,搖晃15-30分鐘至1小時。通常情況下,在此步驟下5分鐘後即可看到幾個蛋白質條帶或斑點。
脫色:丟棄殘留的
1X
Rapid gel stain
快速凝膠染料,用蒸餾水沖洗凝膠直到背景變得清晰。在沖洗步驟中,染料結合的蛋白質會變得更加清晰可見。將凝膠放入蒸餾水中Overnight,可以獲得更清晰的結果,無需擔心染料與蛋白質的結合親和力。
在PVDF膜中:
電泳結束後,用95%甲醇清洗PVDF兩次,每次5分鐘。
讓甲醇清洗過的 PVDF
乾燥
。
用超純水
將
BIO-DOC 7X Rapid gel stain
稀
釋至
1X
。
將乾燥後的PVDF放入稀釋的
1X
Rapid gel stain
中,搖勻15-30分鐘至1小時。通常情況下,在此步驟下,5分鐘後即可看到幾個蛋白質條帶或斑點。
脫色:
倒去
1X
Rapid gel stain
,
用
30-35%乙醇
清洗PVDF膜,
直到背景去除 (蛋白質條帶不會被洗掉)。
用蒸餾水
清洗PVDF
。在水洗步驟中,染料結合的蛋白質會變得更加明顯。
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